Chromatographie liquide
Chromatographie liquide haute performance à détection UV (HPLC-UV)
La chromatographie liquide haute performance à détection UV type DAD permet la séparation de composés organiques non-volatils constitutifs d’un échantillon, puis une identification des molécules détectables en UV.
Les échantillons sont entrainés sous forme liquide à travers une colonne chromatographique balayée par un solvant ou un mélange de solvants. Elles sont ensuite identifiées via un détecteur UV/Vis.
L’analyse par chromatographie liquide couplée à une détection UV peut être soit qualitative, quantitative ou encore semi-quantitative (résultat exprimé en équivalent massique par rapport à un étalon interne).
Exemples d’application :
- Dosage de colorants synthétiques ou naturels (caroténoïdes, anthocyanes, …)
- Dosage de nicotine (54-11-5)
- Dosage d’aldéhydes sous forme de dérivés DNPH
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Chromatographie liquide haute performance couplée à un spectromètre de masse (HPLC-MS)
La chromatographie liquide haute performance couplée à un spectromètre de masse permet la séparation et l’identification de composés organiques non-volatils, ionisables, (jusqu’à 1250Da) constitutifs d’un échantillon.
Les échantillons sont entrainés sous forme liquide à travers une colonne chromatographique balayée par un solvant ou un mélange de solvants. Elles sont ensuite identifiées par spectrométrie de masse.
L’analyse par chromatographie liquide haute performance couplée à un spectromètre de masse peut être soit qualitative, quantitative ou encore semi-quantitative (résultat exprimé en équivalent massique par rapport à un étalon interne).
Selon les molécules des sensibilités autour de 10pg/µL injecté peuvent être atteintes.
Exemples d’application :
- Dosage de principe actif pharmaceutique
- Dosage de nitrosamines non-volatiles (NDELA…)
- Dosage de tensio-actifs dans différentes matrices
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Chromatographie liquide haute performance couplée à un détecteur UV/Vis et à un spectromètre de masse (HPLC-UV/MS)
La chromatographie liquide à haute performance couplée à la fois à la détection UV et à la spectrométrie de masse permet d’obtenir des empreintes UV et massiques des composés constitutifs d’un échantillon.
Exemples d’application :
- Analyse d’authenticité de fruits grâce au profil d’anthocyanes
- Analyse d’acides phénoliques dans des préparations antioxydantes d’origine naturelle
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Chromatographie liquide haute performance couplée à la spectrométrie de masse en tandem (LC-MS/MS)
La chromatographie liquide à haute résolution couplée à la spectrométrie de masse en tandem est utilisée dans l’analyse de traces et d’ultra-traces. L’analyse peut être soit qualitative, quantitative ou encore semi-quantitative (résultat exprimé en équivalent massique par rapport à un étalon interne).
Selon les molécules des sensibilités très élevées autour de 1pg/µL injecté peuvent être atteintes.
Exemple d’application :
- Dosage de composés polyfluorés dont le PFOA (acide perfluorooctanoïque) (335-67-1), le PFOS (acide perfluorooctanesulfonique), et leurs substances de substitution
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Chromatographie liquide haute performance couplée à la spectrométrie de masse de haute résolution (LC-HRMS)
La chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en haute résolution donne accès aux masses exactes des composés détectés ; notre équipement, de technologie Q-TOF (quadrupole – time-of-flight analyzer), atteint un pouvoir de résolution massique de 1 ppm. Il permet d’identifier des composés inconnus, même dans des mélanges complexes, à partir des masses exactes des analytes. Elle donne ainsi des indications sur leurs formules brutes et potentiellement sur les structures moléculaires.
Exemple d’application :
- Analyses non ciblées de composés organiques non volatils : contaminants, métabolomique, etc.
- Identification d’impuretés dans des matrices pharmaceutiques
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